Amostras de sangue são analisadas para identificação de proteínas específicas e suas concentrações por meio do método ELISA.

O método ELISA é um teste usado em imunologia e outros campos científicos para detectar anticorpos e antígenos. ELISA significa ensaio de imunoabsorção enzimática , que se refere ao fato de que anticorpos acoplados a enzimas são usados ​​para determinar os resultados do teste. O método ELISA é usado na medicina para detectar anticorpos contra doenças como medida diagnóstica, e é uma técnica comum usada em pesquisas imunológicas e bioquímicas.

A exposição a fluidos corporais durante a respiração boca a boca e o processo de RCP pode expor os indivíduos ao HIV.

O teste ELISA foi desenvolvido nas décadas de 1960 e 1970 para substituir o teste imunológico que envolvia o uso de anticorpos e antígenos radioativos . Os riscos do uso de materiais radioativos tornaram o processo de teste incômodo e inseguro, e o advento do método ELISA resolveu esses dois problemas. Em vez de usar materiais radioativos para determinar os resultados de um teste, o ELISA usa enzimas que reagem com anticorpos para formar produtos coloridos. O desenvolvimento de cor em um teste ELISA indica um resultado positivo.

Receber uma transfusão de sangue pode inadvertidamente expor um indivíduo ao HIV.

Existem vários tipos diferentes de testes ELISA. O método de ELISA mais comumente usado é chamado de ELISA indireto; este é um teste de anticorpo usado para determinar se um certo tipo de anticorpo está presente em uma amostra e em que concentração . Na medicina diagnóstica, esse teste é usado para detectar a presença de anticorpos para doenças infecciosas como HIV , hepatite e outras. A presença de anticorpos para essas doenças indica que o indivíduo testado foi exposto aos agentes infecciosos. Normalmente, a amostra usada é de sangue de um paciente.

O teste ELISA é comumente usado para testar sinais de exposição ao HIV.

Neste teste, uma proteína de antígeno específica é usada para revestir uma placa de microtitulação. Esta pequena placa de plástico contém 96 poços minúsculos e um único teste ELISA pode ser realizado em cada poço. O antígeno usado para um determinado teste depende do tipo de anticorpo que o teste está tentando detectar. Por exemplo, se o ELISA for usado para um teste de HIV, o antígeno usado será específico para esse vírus.

Um ELISA indireto é usado para determinar se um determinado tipo de anticorpo está presente em uma amostra e em que concentração.

À medida que o teste prossegue, pequenas quantidades da amostra desconhecida são adicionadas a cada poço da placa de microtitulação e a placa é incubada para permitir que os anticorpos da amostra se liguem ao antígeno. Em seguida, um anticorpo de detecção secundário é adicionado a cada poço da placa. Se a amostra contiver qualquer um dos tipos de anticorpos que estão sendo testados, ela se ligará ao anticorpo de detecção secundário durante o período de incubação subsequente.

Se o teste de anticorpos para HIV retornar um resultado positivo, o diagnóstico deve ser confirmado por meio da análise da carga viral.

A chave para o método ELISA é que o anticorpo secundário é marcado com um tipo específico de enzima. A enzima utilizada é capaz de alterar a cor da amostra de teste quando ela reage com seu substrato. Portanto, se uma amostra contém qualquer um dos anticorpos que estão sendo testados, adicionar o substrato a um poço fará com que ele mude de cor, devido à presença do anticorpo secundário e sua enzima associada.

O método ELISA é um teste usado em imunologia para detectar anticorpos e antígenos.

Existem outras variações no método ELISA, incluindo um teste chamado ELISA sanduíche. Isso é usado para detectar antígenos em uma amostra, em vez de anticorpos. Neste teste, a placa de microtitulação é revestida com uma amostra padronizada de anticorpo. Em seguida, a amostra de teste do antígeno é adicionada, seguida pela adição do anticorpo de detecção secundário e sua enzima associada. Assim como no ELISA indireto, a formação de um produto colorido indica um resultado positivo.